美国第二代试管婴儿流程
1、大概流程：
(1)促排：使用促排卵药物刺激卵巢，让多枚卵泡同时成熟和脱落;
(2)取卵：将促排后得到的卵子取出来等待受精;
(3)取精：处理精液，分离出精子细胞用于与卵子体外受精;
(4)处理精子：使用IMSI技术在高倍显微镜下挑选精子用于单精子注入;
(5)精卵结合：使用ICSI技术让精子和卵子在实验室内受精结合成胚胎;
(6)胚胎培养：在实验室内培养胚胎，直至胚胎发育到适合着床的阶段;
(7)胚胎移植：将胚胎移植回子宫内;
(8)验孕：胚胎移植后14天，可由验尿或抽血确定是否妊娠。
2、卵子的处理
在解剖镜下检出卵细胞，用培养液冲洗，判断其成熟度，然后移入卵细胞培养液中，放入5%二氧化碳、37°C培养箱中培养4-6小时，于取卵后4-6小时，用浓度为80KIU/L的透明质酸酶消化卵丘，去卵丘后选择有**极体的成熟助孕进行ICSI授精。
3、精子的处理
如果精子活动度较好(大于5X10的六次方/ml)可采用上游法，如整个Makler计数器视野的精子数目<10条,则直接离心法;如冷冻精液、附睾或睾丸取精，-般采用微量percoll梯度离心法处理。注射前将处理好的精子置于含有pvp的工作液中。< p="">
4、显微注射的过程
(1)精子的制动：将显微镜视野置于PVP工作液的边缘，可见到精子沿边缘游动，然后将显微注射针调节至与精子同一平面，选择一条活动和形态正常的精子，置显微注射针于精子尾部的中点，迅速快捷地切断其尾部，精子活动立即停止，先尾后头将精子吸入显微注射针。
(2)精子的注射：用固定针将卵子轻轻吸稳，使**极体位于6点或12点处，.这样可避免损伤纺锤体，将显微注射针中的精子推出距针尖10-20微米处，将注射针从卵子3点钟或9点钟处穿越透明带及浆膜进入胞浆，直到卵膜穿破为止，回吸部分胞浆，然后再将精子与回吸的胞浆和尽量少的PVP一起注入卵子胞浆内，最后迅速撤出注射针，检查精子是否确实在胞浆内，如果发现精子在卵周间隙，则要重新注射。
第二代试管ICSI技术优点
(1)单精受精率高
(2)精子浓度、形态对受精无影响
(3)单一精子完成试管周期
主要是精子绕过了透明带和卵子质膜对精子进入卵子的阻碍，且精子无需发生顶体反应，单精子注射可以将精子中的基因完整地注射到卵子内，其.他常规无法受精的严重男性不育患者，采用单精子注射技术受精成功率可以达到90%以上。.
(4)保障囊胚品质
健康的囊胚的形成主要依赖于精子和卵子的质量，在ICSI 的基础上，胚胎发育成囊胚后做PGD 遗传学基因诊断(第 三代试管婴儿技术)，能够大幅度提高试管婴儿的成功率。
2、缺点
(1)或增后代不育风险
在试管受精的治疗中，有90%-95%选择使用ICSI技术。然而，一些研究表明，通过ICSI技术诞生的试管儿童，随着年龄的增长会出现更高风险的医学问题，其中就包括男性不育。
(2)违背自然受精的生物学法则而具有很大的遗传风险
(亲代的精子遗传和表观遗传缺陷导致后代遗传风险增加)
ICSI的安全性主要与男方的遗传状态有关，而与ICSI的操作技术本身及精子的运动能力、精子是否成熟无关。少数少弱精症、无精症患者存在遗传缺陷，通过ICSI有可能将此遗传缺陷传递给男性后代。
(3) 致畸作用受争议，安全性不足
虽然ICSI 技术的结果令人鼓舞，但仍没有确切的证据排除其对胚胎发育的影响，即它的致畸作用。但是，同时又有研究表明，ICSI大的致畸率在允许范围内，认为ICSI的操作步骤应该是安全的。所以，目前该技术的安全性还是存在争议的。
美国第二代试管婴儿适合哪些人群
不同于**代试管婴儿技术，第二代试管婴儿主要是针对男方精液质量特别差的患者，具体比较适合的人群如下：
①、适用于男方患有严重的少、弱、畸精子症、梗阻性无精子症的人群;
②、免疫性不育、体外授精过程中发生受精失败的人群;
③、或者是精子顶体异常、患有遗传性疾病，需要对胚胎进行植入前遗传学检查的，需要进行卵胞浆内单精子显微注射这项治疗的人群。
二代试管婴儿的禁忌
1、患有《母婴保健法》规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎移植前遗传学诊断的遗传性疾病 ;
2、男、女一方患有严重的精神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播性疾病 ;
3、任何一方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期 ;
4、任何一方具有助孕等严重不良嗜好 ;
5、女方子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病不能承受妊娠。
